Процесс культивирования эмбрионов непосредственно относится к процедуре искусственного оплодотворения. На сегодняшний день, бесплодие одного из партнёров больше не является окончательным вердиктом в вопросе возможности иметь детей, так как, благодаря достижениям медицины, доступными являются процедуры оплодотворения яйцеклеток в искусственных условиях, в том числе, метод экстракорпорального оплодотворения (метод ЭКО).
Именно ЭКО считается одним из наиболее эффективных способов зачатия ребёнка парами, в которых, в силу наличия некоторых патологий или заболеваний, женщина не может зачать или выносить плод, или же мужчина имеет репродуктивные проблемы. Такой способ является методом преодоления бесплодия, но он не лечит его.
Теория
Проникновение плодного яйца в эндометрий, которым устлана внутренняя поверхность маточной полости, называется имплантацией. В процессе внедрения в слизистую оболочку эмбрион повреждает мягкие ткани, что может стать причиной кровянистых выделений из влагалища. Скорость наступления беременности в различные дни после овуляции (ДПО) зависит от:
- степени разрыхления эндометрия и содержания в нем питательных веществ;
- уровня прогестерона в крови, препятствующего наступлению менструаций;
- наличия в организме инфекционных агентов и микрофлоры в репродуктивных органах.
На 5 день после переноса эмбрионов уже возможно наступление беременности, однако при прохождении процедуры ЭКО ранняя имплантация встречается нечасто. Это связано с развитием эмбрионов вне женского организма, а после переноса им требуется определенное время на адаптацию к новым условиям среды. Зачатие – не одномоментный процесс, каждый этап в процедуре ЭКО имеет огромное значение в наступлении гестационного периода и нормального развития плода.
Многоплодная беременность
Многоплодные беременности после ЭКО встречаются довольно часто. По медицинским показателям, вероятность приживления двух и более эмбрионов после экстракорпорального оплодотворения выше в 30 раз, чем при зачатии естественным способом.
Женщина с многоплодной беременностью попадает в группу риска, поскольку возможность развития аномалий повышается. Приживление двух и более эмбрионов значительно повышает нагрузку на организм. По желанию пациентки может быть произведена редукция – уменьшение количества плодов. Провести такую процедуру возможно до 13 недель.
Сроки имплантации эмбрионов
При слиянии мужской и женской репродуктивных клеток образуется диплоидная клетка, которая начинает активно делиться. Сначала формируется бластомер из 6-8 клеток, затем морула (16-64 клетки) и только потом бластоциста, которая и имплантируется в стенку матки. Репродуктологи выделяют три периода имплантации эмбриона:
- Ранний – 6 ДПО или 3 ДПП в случае прохождения ЭКО;
- Средний – 7-8 ДПО или 5 ДПП трехдневок или пятидневок в случае прохождения ЭКО;
- Поздний – 10 ДПО или 7-8 ДПП в случае прохождения ЭКО.
Средняя имплантация происходит в течение 7-8 дней после овуляции. При экстракорпоральном оплодотворении репродуктологом осуществляется забор созревшего ооцита, после чего он оплодотворяет спермиев в лабораторных условиях. На выращивание бластомеров уходит в среднем 3-5 дней, после чего жизнеспособные эмбрионы подсаживаются в матку. Имплантация плодного яйца на 5 ДПП – достаточно редкое явление, которое в 90% случаев происходит при использовании пятидневных эмбрионов.
Стадия бластомеров
На 2-4 сутки происходит дробление зиготы, образуются бластомеры. Сначала клетка делится пополам, затем каждая из полученных – снова пополам. Но деление происходит несинхронно, поэтому эмбриолог может заметить нечетное количество бластомеров.
В период дробления стадию определяют по числу клеток. Для оценки качества будущего эмбриона учитывают следующие показатели:
- размер и форма;
- количество ядер, в норме – в каждом бластомере по одному;
- состояние цитоплазмы: вакуоли (vac), грануляция (gra), скопление органелл (serr), вредные вещества (rb) – плохие признаки;
- процент фрагментации – количество безъядерных структур, в норме составляет не более 10%.
По итогам осмотра эмбриолог дает оценку и решает, какие зиготы перспективны в дальнейшем развитии.
Стадия компактизации эмбриона
На 3 сутки после оплодотворения начинается процесс компактизации. У бластомеров возникают отростки, которые помогают им плотно зацепиться за соседние клетки, установить контакт. Это происходит за счет специфических белков и ионов кальция.
Постепенно клетки распластываются, формируется цитоскелет. Если на этом этапе в среде будет недостаточно кальция, то зародыш раскомпактизуется. В противном случае образуется морула – это зародыш на стадии компактизации.
Эмбрион на стадии морулы
Постепенно морула теряет зависимость от кальция. Но ее качество оценить тяжело. На электронных снимках клетки выглядят сглаженными, их число определить практически невозможно.
На стадии морулы у хорошего зародыша имеется не менее 8 клеток. Она приобретает ровную сферическую форму, без различных выступов и впадин. Плохой прогноз – наличие вакуолей и фрагментация.
Эмбрион на стадии кавитации
С конца 4- начала 5 суток морула переходит в стадию кавитации. Развитие эмбриона на стадии mcav предполагает появление полости, которая делит его на две части:
- Трофобласт.
- Внутренняя часть клеток.
Полость образуется за счет закачивания в нее жидкости. Это переходный момент, после которого можно сказать, что морула стала бластоцистой.
Эмбрион на стадии бластоцисты
За счет увеличения объема жидкости, начинает увеличиваться объем полости. Через какое время морула переходит в бластоцисту, определяется индивидуально. Процесс может длиться до 12 часов.
На этой стадии бластоцисте присваивают буквенно-числовое обозначение, характеризующее три паратметра:
- цифра от 1 до 6 обозначает стадию развития;
- буквы от А до С – качество внутриклеточной массы;
- вторая буква А, В или С – состояние трофоэктодермы.
Например, эмбрион 4вв стадии – это зародыш среднего качества, который имеет шансы на имплантацию.
Оценка качества зародышей необходима, чтобы врач мог определиться со сроком подсадки, а при использовании витрифицированных эмбрионов – временем разморозки. В некоторых случаях необходима досрочная разморозка и доращивание зародышей.
Имплантация при криопереносе
В эмбриологической практике используют два метода подсадки эмбрионов в маточную полость:
- Моментальный перенос – подсаживание в матку диплоидных клеток сразу после их культивирования в питательной среде;
- Криоперенос – перенос в полость матки эмбрионов, размороженных непосредственно перед проведением ЭКО.
Криоперенос возможен в том случае, если супружеская пара ранее уже пользовалась вспомогательными репродуктивными технологиями для зачатия. Чтобы избежать повторной стимуляции овуляции при неуспешном ЭКО, рекомендуется замораживать часть оплодотворенных яйцеклеток для последующих попыток.
Зачатие на 5 день после криопереноса происходит нечасто, что обусловлено необходимостью прохождения эмбрионами адаптационного периода при проникновении в женский организм. В случае имплантации бластоцисты в эндометрий пациентки могут ощущать объективные изменения в состоянии здоровья.
Третий триместр
Третий триместр требует продолжения наблюдения за состоянием будущей мамы и развитием плода. Женщины посещают курсы, где обучают профилактическим мерам преждевременных родов. Важно ежемесячно проходить допплерометрию кровотока.
После 33 недель, беременным снова проводят скрининговую диагностику ультразвуком. Оценивается:
- состояние плаценты и кровотока;
- соотношение размеров плода к срокам беременности;
- состояние внутренних органов ребенка.
Если будущая мама отмечает у себя симптомы преждевременных родов, которые начались раньше 37 недели, сразу же нужно вызывать скорую помощь. После госпитализации женщине проведут сохраняющую терапию, что позволить выносить ребенка до срока, безопасного для рождения.
Развитие эмбриона по дням
При удачном протоколе ЭКО внедрение эмбрионов в эндометрий происходит по следующей схеме:
- 0 ДПП – подсаживание бластомеров в маточную полость или криоперенос;
- 1 ДПП – эмбрион выходит из белковой оболочки;
- 2 ДПП – бластоциста прикрепляется к поверхности эндометрия;
- 3 ДПП – начинается процесс внедрения бластоцисты в слизистую матки;
- 4 ДПП – процесс вживления зиготы в матку продолжается;
- 5 ДПП – имплантация завершается;
- 6 ДПП – формирующаяся плацента начинает продуцировать ХГЧ;
- 7 ДПП – в организме существенно возрастает содержание ХГЧ.
Вышеописанная схема характерна для ранней имплантации бластоцист в матку. Если процесс внедрения происходит на 5 ДПП пятидневок, ощущения наступления беременности возникают на несколько дней позже.
Второй триместр
Сохранение беременности после ЭКО не всегда дается легко. Пациентки должны постоянно наблюдаться у врача, проходить соответствующее обследование. Женщины регулярно сдают кровь на определение концентрации свободного эстриола, общего ХГЧ и гормонов альфа-фетопротеина. Это позволяет диагностировать нарушения на ранних сроках, например, синдром Патау, Дауна и прочее.
Осмотр врача при ЭКО беременности
В период с 20 по 24 неделю все женщины должны пройти УЗИ второго уровня. Это значит, что, кроме исследования органов женщины, проводят оценку внутренних органов ребенка. Визуализируют также плаценту и определяют качество кровотока в ней.
Признаки зачатия после ЭКО
После процедуры ЭКО многие женщины начинают «прислушиваться» к изменениям в организме, чтобы определить – произошло зачатие или нет. Многие из описанных ими ощущений являются субъективными и в большей степени связаны с волнением, а не с реальными физиологическими изменениями в органах репродуктивной системы.
Условно репродуктологи разделили симптомы после ЭКО на две категории: субъективные и объективные. К субъективным симптомам можно отнести:
- эмоциональную лабильность;
- быстрое утомление;
- тяжесть в нижней части живота;
- покалывание в области матки;
- частую смену настроения;
- выделения из влагалища.
Через несколько суток после переноса эмбриона могут происходить изменения, характерные для начала нового менструального цикла: болезненность в груди, боли внизу живота, тошнота и т.д. Репродуктологи предупреждают, что в случае успешной имплантации эмбриона в матку они полностью исчезают и никак не препятствуют нормальному течению беременности.
К объективным симптомам, возникающим при внедрении бластоцисты в эндометрий, относят:
- повышение базальной температуры;
- обнаружение ХГЧ в сыворотке крови;
- общее повышение температуры до 37.2 градусов Цельсия.
Не исключено возникновение упомянутых ощущений на 5 ДПО при переносе в матку пятидневных эмбрионов. В отличие от «трехдневок», они содержат в себе больше клеток, в связи с чем сокращается период на их последующее деление и превращение из морулы в бластоцисту, готовую к имплантации в матку.
Как происходит подготовка к забору (пункции) яйцеклеток
Культивирование эмбрионов подразумевает необходимость физического изъятия яйцеклетки из яичника женщины. Подобная процедура требует обязательной подготовки, правила которой женщина начинает соблюдать заранее. За пять дней следует избегать половых актов, отказаться от употребления спиртного, жареной, копчёной, жирной пищи. Запрещено посещать баню, сауну, принимать горячие ванны.
Накануне процедуры следует:
- отказаться от ужина (кушать разрешено не позже 17:30);
- снять лак или любое покрытие с ногтевых пластин;
- не употреблять жидкость после 24:00.
Утром перед пункцией запрещено курить, кушать, пить, жевать жевательную резинку. Если женщина носит контактные линзы, на время операции их лучше не надевать.
Дата проведения процедуры должна соотноситься со временем естественной овуляции.
Перенос пятидневок
При ЭКО перенос бластоцисты назначают на 5 или 6 сутки. Процедура выполняется в клинике. Иногда врачи используют местную анестезию во время переноса. Однако в большинстве клиник подсадку бластоцист проводят без обезболивания.
Перед переносом женщина ложится на гинекологическое кресло, как для обычного осмотра. В шейку матки вставляется тонкий катетер, по которому из емкости с водной основой проходят клетки. Процедура занимает не более 15 минут. После переноса клеток рекомендуется полежать.
В следующие 2 недели необходимо следовать рекомендациям врача. От этого зависит успех экстракорпорального оплодотворения. Женщине назначают поддерживающие гормональные лекарства. До получения результатов советуют исключить физические и эмоциональные нагрузки, а также воздержаться от интимных отношений.
Во время ЭКО можно сделать двойной перенос. Такая процедура предполагает посадку трехдневок. Через двое суток процедура повторяется и уже переносится бластоциста. Но высокие риски, связанные с возможностью прерывания наступившей беременности, заставляют врачей отказаться от этой методики.
