Без каких-либо сомнений можно сказать, что бесплодие является огромной проблемой, которая застала врасплох многие молодые пары. Судя по ежегодной статистике, в последнее время очень быстро увеличивается количество женщин, страдающих этим заболеванием. Не редко подобное явление возникает из-за патологий в эндометрии, которые, к слову, можно было устранить еще до наступления беременности.
Тем не менее, шанс полного выздоровления напрямую зависит от того, когда была выявлена проблема и когда занялись её лечением. Для определения возможных причин может использоваться немалое количество методов, одним из которых является иммуногистохимия эндометрия. Это достаточно сложный и в свою очередь специфический спектр анализов, который назначается исключительно лечащим врачом.
Что это такое?
Иммуногистохимия эндометрия – особенное и достаточно трудное в реализации исследование эндометрия. Этот анализ позволяет провести обширное изучение и диагностику слизистой оболочки матки. Если судить по названию, то стаёт понятным то, что ИГХ включает в себя, как гистологические исследования, так и иммунологические. Первые отвечают за изучение состава тканей, а вторые – за поиск возбудителей и антител. В процессе исследования можно будет установить факт присутствия клеток, которые не позволяют женщине забеременеть. В ходе этой процедуры также будет определено и их количество.
С помощью такого анализа можно будет оценить насколько чувствительны рецепторы эндометрия к природной гормональной стимуляции в период, когда проходит овуляция, а также во время проведения активной гормонотерапии перед экстракорпоральным оплодотворением. Это делается в связи с тем, что достаточно часто возникает следующая проблема: здоровье женщины в норме, гормональный уровень и эндометрий так же, не найдены антиспермальные антитела, но, несмотря на это, она не может забеременеть. Главной причиной подобного явления является такой факт: эндометрий отказывается воспринимать гормональное воздействие, в связи с чем не обновляется и не утолщается.
Для чего применяют анализ ИГХ в онкологии?
иммуногистохимия помогает решать следующие задачи:
- Уточнить диагноз, вид и подвид злокачественной опухоли, если этого не позволяет сделать цитологическое и гистологическое исследование. Например, существует около 70 разновидностей лимфом и лейкозов. Чаще всего их диагностируют с помощью иммуногистохимии. Иногда дополнительно требуется проведение исследования.
- Выявить природу и локализацию основной опухоли, если удалось обнаружить только отдаленные метастазы, и неясно их происхождение.
- Подобрать оптимальную схему терапии. С помощью иммуногистохимического анализа можно оценить чувствительность злокачественной опухоли к тем или иным лекарственным препаратам, обнаружить «молекулярные мишени» для противоопухолевых средств.
- Оценить степень злокачественности опухолевых клеток, прогноз.
- Дифференциальная диагностика: исследование помогает отличить злокачественные опухоли от доброкачественных новообразований, неопухолевых процессов.
- Диагностировать множественные опухоли. Иммуногистохимию рака применяют, когда у пациента имеется подозрение на одновременное наличие двух и более разных типов злокачественных опухолей.
Что выявляет и когда назначается
Как уже было сказано выше, предназначением ИГХ является диагностика бесплодия. Таким образом, рассмотрим наиболее частые случаи назначения иммуногистохимического анализа:
- Экстракорпоральное оплодотворение выявилось безуспешными;
- У пациентки постоянно случаются выкидыши на ранних сроках беременности;
- У женщины наблюдаются симптомы бесплодия, но диагноз еще не подтвержден;
- Поставлен диагноз бесплодие.
Кроме того, как показывает опыт, при подобном исследовании кроме причины бесплодия, может быть выявлена и эндометрия иного типа. В связи с этим, ИГХ часто назначается в таком случае, когда нужно провести диагностику хронического вялотекущего эндометрита, определить который другими методами не удаётся. Также в процессе исследования могут быть поставлены и следующие диагнозы:
- Неполная трансформация эндометрия;
- Эндометрит;
- Нарушение и десинхронизация фаз его развития;
- Гиперплазия.
Приблизительно в 70-75% случаев именно одна из выше наведенных причин приводит к бесплодию. Стоит отметить, что все эти болезни достаточно легко поддаются лечению, если были выявлены на ранних этапах.
ИГХ в основном исследует биоптат слизистой матки. Получают этот материал с помощью специальной аспирационной кюретки – пайпеля. Процесс является безболезненным и не требует использования анестезии.
По завершению исследования врач рассчитывает срок имплантационного окна – определенный промежуток времени, при котором наблюдается наибольшее соответствие эндометрия и эмбриона. На протяжении этого срока проверяется наличие пиноподий. В норме имплантационное окно начинают фиксировать с 20 по 24 день менструального цикла.
Стоимость анализа в клинике Медицина 24/7
В клинике Медицина 24/7 иммуногистохимические анализы при раке и ряде других заболеваний выполняются методом флюоресцентной гибридизации in situ. Антитела, присоединившиеся к антигенам, дают при осмотре под микроскопом свечение. Цены на иммуногистохимию в нашей клинике представлены ниже.
Материал подготовлен заместителем главного врача по лечебной работе клиники «Медицина 24/7», кандидатом медицинских наук Сергеевым Петром Сергеевичем.
Источники:
- Бейсенаева А. Р. Роль иммуногистохимического исследования в онкологии // Медицина и экология. 2015. №2 (75).
- Непомнящих Л. М., Лушникова Е. Л., Вержбицкая Н. Е., Мительман Ю. М., Жук А. Г. Иммуногистохимические исследования в онкоморфологии // Сибирский онкологический журнал. 2006. №3.
- Жук А. Г., Ившина Ю. А., Мительман Ю. М. Иммуногистохимическое исследование гиперпластических процессов и рака молочной железы // Сибирский онкологический журнал. 2006. №3.
С помощью иммуногистохимического исследования выполняется:
- определение вида и подвида опухоли;
- определение распространенности онкологического очага;
- при исследовании метастазов определяется их источник;
- оценка эффективности лечения онкозаболеваний;
- определение степени злокачественности опухоли;
- выясняется пролиферативная активность опухолей (с какой скоростью они растут).
Противопоказания
Иммуногистохимическое исследование эндометрия не имеет особых противопоказаний. Единственным случаем, когда невозможно сделать данный анализ, является невозможность забора образцов тканей, нужных для исследования. Тем не менее, стоит отметить и показания для проведения этой процедуры:
- Неоднократные провальные попытки ЭКО;
- Невынашивание беременности на ранних сроках;
- Подозрение на злокачественное новообразование;
- Исследование бесплодия и выявление его причин.
Стоит отметить, что с помощью ИГХ можно исследовать практически любые ткани. Среди выше наведенных показаний самым главным является подозрение на злокачественное новообразование.
Как проводится иммуногистохимическое исследование
Само исследование состоит из четырех этапов:
- Долабораторный этап, заключающийся в получении адекватного образца ткани для анализа. Ткань для исследования может быть получена с помощью инцизионной или эксцизионной биопсии, punch-biopsy (с помощью щипцов) или же в ходе эндоскопической операции. Процедура получения биоптата, а также подготовка к ней, определяются видом и локализацией опухоли. Полученную ткань помещают в 10% раствор формалина и отправляют в лабораторию.
- Подготовка, в ходе которой производится обработка биоптата с последующим первичным его изучением. На этом же этапе из кусочка ткани готовят тончайшие срезы.
- Окрашивание срезов иммуногистохимическими препаратами, представляющими собой раствор специфических антител. В зависимости от того сколько различных типов антител использую, выделяют малую и большую панели исследования. В малую панель входит до 5 антител, в большую – от 6 и до нескольких десятков. Количество определяемых маркеров зависит от предполагаемого диагноза.
- Исследование и анализ окрашенных образцов, после которого выносится заключение.
Правильная подготовка
Поскольку забор нужного для исследования материала выполняется методом обычного выскабливания, то нужно понимать, что его требуется проводить только в период, когда эндометрий готов к этому. Из-за этого врач вынужден назначить сдачу анализов на определенный день. Данную процедуру строго не рекомендуется проводить в любой другой день. В большинстве случаев материал можно забирать на 5-7 сутки цикла для проведения диагностики воспалительных процессов, а также разрастаний. Если требуется оценка рецепторной функции, то проводят процедуру на 20-24 день.
Кроме того, существует небольшой перечень правил, которых нужно придерживаться:
- Не принимать гормональные препараты на протяжении недели перед исследованием;
- Не принимать кроворазжижающие средства, чтобы избежать кровотечения после процедуры биопсии;
- Соблюдать все правила гигиены в день, когда будет проводится ИГХ.
Как проводят анализ?
Для того чтобы провести исследование на различные опухолевые маркеры, врач должен выполнить биопсию — получить фрагмент ткани злокачественной опухоли и отправить его в лабораторию. Там материал особым образом подготавливают (с помощью парафинизации или заморозки),обрабатывают соответствующими антителами и изучают под микроскопом. Иммуногистохимия опухолей позволяет не только выявить искомое вещество, но и оценить его локализацию в ткани, судить о количестве.
После того как исследование завершено, лечащий врач получает из лаборатории заключение. Сроки проведения анализа установлены пунктом 24 Приказа Минздрава России № 179н от 24 марта 2021 г. Если опухолевую ткань исследуют на 5 разных маркеров или меньшее количество, результат должен быть готов в течение одной недели, если на большее количество — в течение 15 дней.
Ход процедуры
Иммуногистохимический анализ эндометрия проводится следующим образом:
- Вводится обезболивающее;
- Установка специальных расширителей;
- Профилактические меры;
- Введение гистероскопа;
- Процедура выскабливания;
- Извлечение препарата;
- Прижигание поврежденных сосудов;
- Извлечение оборудования;
- Повторное сканирование каждого из органов;
- Снятие расширителей.
После выполнения всех этих процедур пациентку переводят в отдельную палату, где она будет находится до того момента, пока не отойдет от анестезии. После этого она уже может покинуть больницу. Результаты можно будет получить уже через несколько дней.
Положительные и отрицательные стороны
- Требуется минимум биоматериала и реактивов;
- Определяет рак на ранней стадии;
- Быстрый результат;
- Точность и достоверность.
Дополнительное преимущество – в возможности трехмерного моделирования. Ответная реакция на антитела видна через три часа. Окончательное заключение дается через 7-10 дней. По истечении этого времени будет точно установлен тип рака и стадия заболевания, а также его первичный очаг. Изменение цвета маркеров обычно не имеет разночтений при постановке диагноза. На итоговом бланке прописывают расшифровку результатов.
Достоверность зависит от метода окрашивания образца реактивами. Это делается автоматически и вручную. При ручном методе не исключён человеческий фактор, ошибки лаборантов. Лечащий врач подскажет, в какую лабораторию обратиться. Пациент может самостоятельно поинтересоваться, как проводится анализ в конкретном учреждении. Для достоверности результата он может проводиться повторно или в двух лабораториях.
Погрешность в результате возникает по вине пациента. Перед биопсией следует отказаться от гормональных препаратов и других лекарств, от физических нагрузок, придерживаться диеты. Внешние факторы влияют на результаты.
Расшифровка
Расшифровка выполняется только врачом в связи с тем, что не существует общей для всех нормы. Она в основном зависит от физиологического возраста женщины, её гормонального фона и прочих факторов. Более простой является ситуация с эндометритом.
Специалист использует полученные результаты анализов с целью определения сдвига имплантационного окна. Кроме того, проверяется состояние эндометрия в определенный момент цикла. Результаты анализов биоптата смогут с 100% точностью указать на то, есть ли у пациентки воспалительный процесс в полости матки.
Дополнительная информация
Литература:
- Проект приказа Минздрава России от 21 ноября 2012 г. «Об утверждении Порядка оказания медицинской помощи по профилю «патологическая анатомия»
- Иммуногистохимические методы: руководство. Пер. с англ. под ред. Г.А. Франка и П.Г. Малькова // М., 2011, – 224 с.
| цена услуги | от 2750 руб. |
доступно в 199 клиниках Москва
- Онкомаркер альфа-фетопротеин (АФП), (кровь)
- Онкомаркер СА — 19-9, (кровь)
- Иммунохимия крови и мочи (комплекс)
- Гистологическое исследование биопсийного материала
- Медико-логопедическое исследование
- УЗИ почек, надпочечников
Неправильный формат номера телефона.
Заявка на обратный звонок принята.
Уважаемый пользователь, приносим искренние извинения, но версия для слабовидящих временно недоступна по техническим причинам.
1.1. Настоящее Положение (далее – «Положение») принято в Обществе с ограниченной ответственностью «Медоблако» (далее – Оператор) и предназначено для определения основ деятельности Оператора по обеспечению сохранности и конфиденциальности персональных данных граждан в соответствии с требованиями действующего законодательства Российской Федерации, а также в целях регламентации порядка работы с персональными данными в Организации.
1.2. Положение разработано в соответствии с Уставом Оператора, Федеральным законом от 27.07.2006 № 152-ФЗ «О персональных данных», Федеральным законом от 21.11.2011 № 323-ФЗ «Об охране здоровья граждан в Российской Федерации», законодательными актами Российской Федерации.
1.3. Положение обязательно для соблюдения всеми работниками Оператора.
1.4. Положение вступает в действие с момента утверждения его приказом Генерального директора Оператора и действует до утверждения нового Положения.
1.5. Все изменения и дополнения к Положению должны быть утверждены приказом Генерального директора Оператора.
2.1. Персональные данные − любая информация, относящаяся к прямо или косвенно определенному или определяемому физическому лицу (субъекту персональных данных).
2.2. Обработка персональных данных − любое действие (операция) или совокупность действий (операций), совершаемых с использованием средств автоматизации или без использования таких средств с персональными данными, включая сбор, запись, систематизацию, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передачу (распространение, представление, доступ), обезличивание, блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.
2.3. Автоматизированная обработка персональных данных − обработка персональных данных с помощью средств вычислительной техники.
2.4. Оператор персональных данных — лицо, самостоятельно или совместно с другими лицами организующее и (или) осуществляющее обработку персональных данных, а также определяющее цели обработки персональных данных, состав персональных данных, подлежащих обработке, действия (операции), совершаемые с персональными данными.
2.5. Представление персональных данных − действия, направленные на раскрытие персональных данных определенному лицу или определенному кругу лиц.
2.6. Распространение персональных данных – действия, направленные на раскрытие персональных данных неопределенному кругу лиц.
2.7. Уничтожение персональных данных − действия, в результате которых становится невозможным восстановить содержание персональных данных в информационной системе персональных данных, и (или) в результате которых уничтожаются материальные носители персональных данных.
2.8. Обезличивание персональных данных − действия, в результате которых становится невозможным без использования дополнительной информации определить принадлежность персональных данных конкретному субъекту персональных данных.
2.9. Субъекты персональных данных − работники Оператора, сотрудники и представители действующих и потенциальных контрагентов Оператора, действующие и потенциальные клиенты Оператора, представители (в силу закона и по доверенности) действующих и потенциальных клиентов Оператора.
3.1. Оператор в своей деятельности обеспечивает соблюдение принципов обработки персональных данных, указанных в ст. 5 Федерального закона от 27.07.2006г. № 152-ФЗ «О персональных данных».
3.2. Оператор осуществляет сбор и дальнейшую обработку персональных данных в следующих целях:
— ведение кадрового, бухгалтерского и налогового учета;
— фактическое осуществление предусмотренных учредительным документом Оператора видов деятельности, внешний и внутренний контроль бизнес-процессов;
— взаимодействие с контрагентами, ведение договорной работы в рамках возникновения, изменения и прекращения правоотношений между Оператором и третьими лицами, а также оформление доверенностей на представление интересов Оператора;
— рассмотрение и учет поступающих обращений любого характера, осуществление информационного обслуживания клиентов;
— осуществление дистанционного взаимодействия Оператора с клиентами и иными лицами в рамках сервисно-информационного и иного обслуживания путем использования телефонной связи, электронной почты;
— организация и осуществление комплекса мероприятий, направленных на поддержание и (или) восстановление здоровья клиентов и включающих в себя предоставление медицинских услуг;
— организация и осуществление Оператором внутреннего контроля качества медицинской помощи;
— осуществление дистанционного взаимодействия Оператора с клиентами и иными лицами посредством сайта Оператора в сети «Интернет».
3.3. Обработка персональных данных Оператором включает в себя сбор, запись, систематизацию, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передачу (распространение, предоставление, доступ), обезличивание, блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.
3.4. Оператором осуществляется обработка персональных данных с использованием средств автоматизации и без использования средств автоматизации.
3.5. Оператором установлены следующие условия прекращения обработки персональных данных:
Результаты
Во всех группах гистологическая характеристика эндометрия соответствовала простой гиперплазии эндометрия без атипии.
Отмечалось увеличение количества как железистых, так и стромальных элементов. Однако отсутствовало заметное тесное расположение желез. Железы были округлыми и разнообразными по величине.
Результаты иммуногистохимического исследования эндометрия всех пациенток представлены в табл. 2.
Таблица 2. Результаты иммуногистохимического исследования эндометрия у пациенток обследованных групп Примечание. * — количество позитивных клеток в поле зрения при увеличении 400; ** — индекс пролиферации (отношение количества окрашенных ядер к общему количеству ядер, %); *** — количество окрашенных ядер стромальных клеток в поле зрения при увеличении 400; # — количество окрашенных ядер в поле зрения при увеличении 400; ## — количество позитивных клеток.
Выводы
1. Выявлены особенности изменения уровней морфофункциональных и иммуногистохимических маркеров эндометрия и показателей иммунного ответа у женщин разных возрастных групп с гиперплазией эндометрия и бесплодием.
2. Полученные данные о повышении экспрессии маркера пролиферации Ki67, малом количестве CD56-позитивных клеток, небольшом количестве макрофагов СD68 и снижении экспрессии маркера VEGF позволяют сделать заключение о том, что прогностически наиболее неблагоприятным периодом для возможного наступления беременности является возраст женщины старше 40 лет.
Обсуждение
В 1-й и 2-й группах была выявлена неравномерная, низкая пролиферативная активность. Отмечалась тенденция к большей экспрессии маркера клеточной пролиферации Ki67 (железы) у пациенток 3-й группы, что соответствовало наибольшей активности гиперпластического процесса в данной группе и могло свидетельствовать о наличии неполноценного «окна имплантации». В 1-й и 2-й группах отмечалось снижение уровня экспрессии Ki67 (строма) по сравнению с этим показателем в 3-й группе (р
<0,05). У пациенток старшего репродуктивного возраста отмечалось повышение экспрессии маркера пролиферации Ki67, что может служить доказательством усиления у них процессов пролиферации клеток эндометрия и их апоптоза, особенно в поверхностных слоях (рис. 1).
Рис. 1. Высокая экспрессия Ki67 в эпителии желез и в клетках стромы у пациенток 3-й группы. Иммуногистохимическая реакция. Ув. 200.
При сравнении экспрессии эстрогеновых (ER) и прогестероновых (PR) рецепторов достоверных различий в группах выявлено не было. В ходе исследования обнаружено, что соотношение ER и PR в стадии пролиферации были практически равны 1. В 1, 2 и 3-й группах показатели экспрессии ER и PR были приблизительно равными (р
>0,05). Таким образом, возрастных различий в экспрессии ER и PR в пролиферативную фазу выявлено не было.
Во всех группах отмечалось малое количество основных иммунокомпетентных клеток эндометрия (CD56-позитивных клеток) (р
>0,05), проявляющееся низкой цитотоксической активностью и небольшим количеством макрофагов СD68 в эндометрии, что может неблагоприятно влиять на процесс имплантации (рис. 2).
Рис. 2. Слабое представительство CD56-позитивных лимфоцитов в строме эндометрия у пациенток обследованных групп.
Анализ концентрации маркера плазматических клеток CD138 показал, что уровень его экспрессии у пациенток 1-й и 2-й групп был невысоким (р
<0,05), а в эндометрии у пациенток 3-й группы экспрессия CD138 отсутствовала. Это свидетельствовало о незначительных воспалительных изменениях в эндометрии у пациенток 1-й и 2-й групп и отсутствии воспалительных процессов у пациенток 3-й группы.
В 3-й группе экспрессия VEGF проявлялась позитивной реакцией в отдельных клетках стромы, в эндотелии сосудов экспрессия отсутствовала, а в 1-й и 2-й группах отмечалась позитивная реакция во всех клетках стромы и в эндотелии сосудов. Это свидетельствовало о наибольшем снижении процессов неоангиогенеза в 3-й группе, и, таким образом, о недостаточном кровоснабжении, и приводило к гипоксии вследствие уменьшения диффузии кислорода. Низкий уровень VEGF способствовал бедному сосудообразованию, которое в дальнейшем еще более уменьшало сосудистый кровоток в эндометрии.
Экспрессия CD34 (маркер, отвечающий за ранние этапы кроветворения) во всех группах проявлялась позитивной интенсивной реакцией в эндотелии спиральных артерий, многочисленных капиллярах и клетках стромы, что свидетельствовало о том, что сосуды закладывались нормально, шла нормальная пролиферация эндотелиоцитов (рис. 3).
Рис. 3. Многочисленные мелкие сосуды в строме гиперплазированного эндометрия. Иммуногистохимическая реакция с антителами к CD34. Ув. 200.
Однако во 2-й группе отмечались превосходящие показатели для данной фазы менструального цикла (пролиферации), что могло свидетельствовать о том, что имеет место повышенный процесс ангиогенеза в строме эндометрия. В норме нарастание экспрессии CD34 в базальном слое и строме эндометрия отмечалось во второй фазе цикла. Таким образом, у пациенток 2-й группы можно было предположить низкую вероятность фиброза эндотелиоцитов, что не исключало наличия его у пациенток 1-й и 3-й групп.
